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泌尿感染模型構(gòu)建
更新時(shí)間：2025-06-23
訪問(wèn)量：157
廠商性質(zhì)：其他
一、泌尿感染模型構(gòu)建選擇依據(jù)
| 模型類型 | 適用研究 | 常用病原體 |
|---|---|---|
| 急性膀胱炎 | 宿主-病原體互作機(jī)制 | 大腸桿菌UPEC（如UTI89） |
| 腎盂腎炎 | 上尿路感染病理生理學(xué) | 肺炎克雷伯菌、變形桿菌 |
| 導(dǎo)管相關(guān)UTI | 生物膜形成與器械相關(guān)感染 | 銅綠假單胞菌、表皮葡萄球菌 |
| 慢性/復(fù)發(fā)性UTI | 免疫逃逸與持久性感染 | 大腸桿菌（形成細(xì)胞內(nèi)菌落） |
二、泌尿感染模型構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)化操作流程（以UPEC膀胱感染為例）
1. 材料準(zhǔn)備
動(dòng)物：8-10周齡雌性C57BL/6小鼠（雌性尿道短更易感染）
菌株：熒光標(biāo)記的UPEC（如UTI89-GFP，便于顯微觀察）
試劑：
PBS（pH 7.4）、0.1%明膠（增強(qiáng)細(xì)菌粘附）
麻醉劑（異fu烷）、導(dǎo)尿管（24G靜脈套管針）
2. 感染步驟
術(shù)前準(zhǔn)備：
禁水4小時(shí)（提高膀胱內(nèi)細(xì)菌定植率）。
麻醉小鼠，仰臥位固定，消毒尿道口。
膀胱導(dǎo)尿與接種：
將24G套管針插入尿道（深度約1cm，至膀胱）。
注入50μL菌液（1×10^7-10^8 CFU，含0.1%明膠）。
夾閉尿道口1分鐘防止反流。
術(shù)后管理：
恢復(fù)自由飲水，單籠飼養(yǎng)觀察。
3. 關(guān)鍵參數(shù)
細(xì)菌劑量：1×10^7 CFU（急性模型）、1×10^5 CFU（慢性模型）
感染周期：
急性：24-48小時(shí)（炎癥峰值）
慢性：≥7天（研究持久性感染）
三、其他泌尿感染模型
1. 腎盂腎炎模型
操作改進(jìn)：
尾靜脈注射1×10^6 CFU UPEC（通過(guò)血行感染腎臟）。
或直接經(jīng)輸尿管插管接種（需顯微手術(shù)技術(shù)）。
檢測(cè)重點(diǎn)：
腎臟細(xì)菌載量（CFU/g）、組織病理（腎膿腫評(píng)分）。
2. 導(dǎo)管相關(guān)UTI模型
操作：
膀胱植入硅膠導(dǎo)管（長(zhǎng)度2mm）。
接種5μL菌液（1×10^5 CFU銅綠假單胞菌）。
7天后取出導(dǎo)管，超聲震蕩后CFU計(jì)數(shù)。
檢測(cè)：掃描電鏡觀察導(dǎo)管表面生物膜。
3. 復(fù)發(fā)性UTI模型
策略：
先建立急性感染（1×10^7 CFU UPEC）。
抗生素治療后（如環(huán)bing沙星3天）誘導(dǎo)再感染。
四、感染評(píng)估方法
| 檢測(cè)目標(biāo) | 方法 | 判定標(biāo)準(zhǔn) |
|---|---|---|
| 細(xì)菌載量 | 膀胱/腎臟勻漿CFU計(jì)數(shù) | >1×10^4 CFU/器官提示感染成功 |
| 炎癥指標(biāo) | 尿液中白細(xì)胞酯酶試紙檢測(cè) | ≥++為陽(yáng)性 |
| 組織病理 | HE染色（膀胱/腎臟） | 膀胱黏膜水腫、中性粒細(xì)胞浸潤(rùn) |
| 生物膜 | 共聚焦顯微鏡（SYTO9/PI染色） | 膀胱上皮表面細(xì)菌聚集體 |
| 免疫應(yīng)答 | qPCR檢測(cè)IL-6、IL-8 mRNA | 表達(dá)量上調(diào)≥3倍 |
五、注意事項(xiàng)與優(yōu)化
性別選擇：
雌鼠尿道短（3-5mm），更易操作且感染率高。
接種技巧：
導(dǎo)尿時(shí)避免損傷膀胱（進(jìn)針阻力突然消失提示進(jìn)入膀胱）。
減少污染：
接種前擠壓小鼠腹部排空殘余尿。
模擬臨床：
使用臨床分離的ESBL大腸桿菌增強(qiáng)轉(zhuǎn)化價(jià)值。
六、常見問(wèn)題解決
低感染率：
增加禁水時(shí)間至6小時(shí)，或使用D-甘露糖預(yù)處理（抑制細(xì)菌清除）。
膀胱穿孔：
改用更細(xì)導(dǎo)管（26G），限制插入深度。
全身感染：
降低接種劑量至1×10^6 CFU以下。
